Domande frequenti

Per garantire che l'efficienza delle colonne del modello di riduzione- sia coerente con il processo di produzione, il cliente è tenuto a spedirci le colonne per cromatografia pre-confezionate prima di condurre la convalida dell'eliminazione virale per il processo di cromatografia. Inoltre, se il cliente non è in grado di eseguire le operazioni in loco, il nostro personale di laboratorio potrebbe essere incaricato di eseguire gli esperimenti di validazione. Il cliente dovrà presentare una richiesta di incarico PM (Project Management) per la cromatografia e fornire una scheda dettagliata dei parametri di processo. Il nostro personale di laboratorio imposterà quindi il metodo operativo per la validazione della cromatografia, redigerà un registro delle operazioni e lo invierà al cliente per conferma. La nostra azienda effettuerà in anticipo una simulazione di esecuzione e il personale tecnico del cliente confermerà che i cromatogrammi e le forme dei picchi della simulazione di esecuzione sono coerenti con il processo di produzione. Solo dopo la conferma il nostro personale di laboratorio procederà con gli esperimenti di validazione formale. Le registrazioni ed i cromatogrammi risultanti verranno forniti insieme al personale tecnico del cliente per la revisione finale.

Le condizioni di massimo sporcamento e le condizioni di massima interruzione del processo. Le condizioni massime di incrostazione vengono determinate in base alla selezione della capacità di carico, della pressione di filtrazione, del pH del campione, della conduttività e di altri parametri rilevanti.

Per l'applicazione IND sono necessari almeno due lotti o un lotto con analisi duplicate e il pannello di virus indicatori utilizzato è relativamente limitato. Generalmente, per l'inattivazione a basso pH, è richiesto almeno MVM (Mouse Minute Virus); per la nanofiltrazione e la cromatografia sono necessari almeno MVM e MVM (Mouse Parvovirus).

Per l'applicazione BLA, innanzitutto, sono necessari almeno due lotti o un lotto con esecuzioni duplicate. Inoltre, deve essere testato un pannello virale completo, comprendente: per l'inattivazione a basso pH - X-MuLV (virus della leucemia murina xenotropica) e PRV (virus della pseudorabbia); per nanofiltrazione e cromatografia - X-MuLV/PRV/Reo-3/MVM.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Esistono generalmente due principi per la riduzione del processo cromatografico-. Il più comune è il principio di scala lineare-down, in cui l'altezza del letto della colonna e la portata lineare vengono mantenute costanti, ottenendo lo stesso tempo di residenza. L'altro è il principio del tempo di residenza costante, applicabile alle modalità di legame-e-eluizione come la cromatografia di affinità, la cromatografia di interazione idrofobica (HIC) e la cromatografia a scambio ionico. In base a questo principio, anche se l’altezza del letto della colonna e la portata lineare differiscono, mantenendo lo stesso tempo di permanenza si può comunque raggiungere l’equivalenza. Tuttavia, questo approccio presenta dei limiti e non è applicabile ai processi cromatografici dominati dalla diffusione per convezione-che si basano su numeri di piastre teorici, come la cromatografia con filtrazione su gel e la modalità flusso-attraverso della cromatografia a scambio ionico. Inoltre, non è applicabile alla cromatografia in modalità-mista.